您现在的位置:首页 > 资料下载 > 恒远产品文献:VEGF酶联免疫试剂盒引用文献

恒远产品文献:VEGF酶联免疫试剂盒引用文献

  • 发布日期:2020/4/10      浏览次数:689
  • 提 供 商: 上海恒远生物科技有限公司 资料大小: PNG
    图片类型: PNG 下载次数: 220
    资料类型: PDF 浏览次数: 689
    相关产品:
    详细介绍: 文件下载    图片下载    

    木瓜蛋白酶对兔膝关节骨关节炎滑膜病变的诱导作用
    张 林,张 兵,李 博,康 晋
    西安医学院第二附属医院 骨外科,陕西 西安 710038

    摘 要:目的 探讨木瓜蛋白酶诱导兔膝关节骨关节炎模型的滑膜病理变化。方法 纳入 30 只新西兰大白兔,随机分为对照和模型组,模型组动物均采用木瓜蛋白酶注射方式制备膝关节骨关节炎模型,术后 2、4、6 周,分别取两组各 5 只动物,处死后获得滑膜组织标本,观察一般情况,对两组不同时间的滑膜进行 Mankin 评分;苏木精-伊红(HE)染色观察病理变化;酶联免疫法检测滑膜血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平。结果 木瓜蛋白酶单次注射后第 2 周,对模型组动物进行病理观察,可见膝关节出现严重的滑膜炎性反应,滑膜细胞与下层疏松纤维及血管组织均明显增生,并存在大量淋巴浆细胞浸润;随着时间推移,炎性反应逐渐减轻。随着注射时间的延长,模型组 Mankin 评分、VEGF和 IL-1β 表达水平均呈下降趋势,对照组无明显变化;模型组木瓜蛋白酶注射后 2、4 周的 Mankin 评分、VEGF 和 IL-1β 表达水平均显著高于对照组(P<0.05),注射后 6 周的 Mankin 评分、VEGF 和 IL-1β 表达水平与对照组化比较差异无统计学意义。结论 木瓜蛋白酶可以诱导兔膝关节骨关节炎模型,木瓜蛋白酶单次注射后第 2 周,兔膝关节滑膜炎性反应严重,第4、6 周时炎性反应逐渐减轻。
    关键词:膝关节;骨关节炎;木瓜蛋白酶;动物模型;滑膜;血管内皮生长因子(VEGF);白细胞介素-1β(IL-1β)

    中图分类号:R965.1

    文献标志码:A

    文章编号:1674 - 6376(2018)01 - 0078 - 05
    DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2018.01.013
    骨关节炎是一种慢性关节疾病,以关节软骨退行性变以及继发性骨质增生为主要特征[1]。以往对骨关节炎的研究大多集中在关节软骨以及软骨细胞和软骨下骨等方面[2-4],但越来越多的资料表明,关节周围的滑膜与疾病之间存在十分密切的关系。木瓜蛋白酶注射方式诱导膝关节骨关节炎是常用的模型制备方法,具有操作简单等优点[5],但关于其诱导膝关节骨关节炎模型对滑膜病理作用的相关问题,报道较少。本实验利用新西兰大白兔,采用木瓜蛋白酶注射方式制备膝关节骨关节炎模型,通过对注射后不同时间动物滑膜进行 Mankin 评分和血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平检测,探讨木瓜蛋白酶诱导膝关节骨关节炎模型兔滑膜病的作用机制。
    1 材料
    1.1 实验动物
    30 只新西兰大白兔,雌性,体质量约 2 kg,健康状况良好,均由山东省农科院提供,动物许可证号SCXK(鲁)2010-0025。本次研究相关方案均提交本院医学伦理部门审核,并经批准,符合相关伦理学要求。
    1.2 药物及主要试剂
    木瓜蛋白酶,批号 Z26149871,规格 500 mL,上海子起生物科技有限公司;乙醇,北京绿源大德生物科技有限公司;磷酸缓冲(PBS)液,上海心语生物科技有限公司;VEGF 酶联免疫试剂盒,上海恒远生化科技有限公司;IL-1β 酶联免疫试剂盒,北京绿源大德生物科技有限公司;中性甲醛,上海瑶韵生物科技有限公司;盐酸乙醇,上海研盟生命科学发展有限公司;匀浆器,北京明阳科华生物科技有限公司;光学显微镜,北京五洲东方科技发展有限公司。
    2 方法
    2.1 动物分组及膝关节骨性关节炎模型[6-8]的制备30 只动物随机分为 2 组:对照组、模型组,每组 15 只。模型组动物均采用木瓜蛋白酶注射制备膝关节骨关节炎模型,选择兔左膝关节进行常规备皮和乙醇消毒,屈曲 45°,利用注射器进行 4%木瓜蛋白酶水溶液注射。进针点为髌骨下极髌腱外缘,注射中向髁间窝方向进针,达到股骨髁后回撤 2 mm,注射溶液 0.1 mL。术后观察动物注射侧情况,如果出现明显的肿胀,存在屈伸功能障碍,则视为建模成功。经观察,本次模型组 15 只动物均建模成功。对照组不予以特殊处理,术后对两组动物置于相同的环境下喂养。
    2.2 术后标本获取[9]
    木瓜蛋白酶注射后第 2、4、6 周,各组分别取5 只动物,麻醉后处死。即刻切取髌下脂肪垫处滑膜组织约 0.3 mm。利用 PBS 液对组织标本进行洗涤,平均分为两份,一份用于滑膜组织病理观察与Mankin 评分,另一份用于酶联免疫法检测 VEGF和 IL-1β 水平。

    ......想要阅读文献全文,可点击下载或者前来咨询我司业务员领取哦!