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恒远产品文献:TGF-β,VEGF,EGF试剂盒引用文献

  • 发布日期:2020/4/3      浏览次数:813
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    复方苦参黄柏溶液经氧驱动雾化对急性创伤修复模型大鼠EGF、VEGF、TGF-β的影响
    窦群立1,袁韩涛2,黄雅松2,申海滨2
    (1.陕西中医药大学附属医院,陕西 咸阳 712000;2.陕西中医药大学,陕西 咸阳 712000)

    【摘要】目的 探讨复方苦参黄柏溶液经氧驱动雾化对急性创伤修复模型大鼠EGF、VEGF、TGF-β的影响。方法 选取SPF级成熟年龄SD大鼠75只,随机分成五组,各15只:生理盐水组、复方苦参黄柏溶液组、氧疗组、复方苦参黄柏溶液+氧疗组、康复新液组。适应性喂养1周后进行造模,并于造模成功之后的第2天开始给药,在造模后的第3天、第7天、第10天、第14天观察创面组织学的改变。在第3天、第7天、第14天对创面进行标本采集,用ELISA检测标本中EGF、VEGF、TGF-β的含量。结果 创面组织学生长情况:在检测的同一时期,复方苦参黄柏溶液+氧疗组成纤维细胞数量,新生毛细血管,胶原纤维等生长明显强于其余四组,差异有统计学意义(P<0.05)。生理盐水组差,其余三组介于三者之间且差异不大。标本中EGF、VEGF、TGF-β含量检测情况:在检测的同一时段,复方苦参黄柏溶液+氧疗组EGF、VEGF、TGF-β含量明显高于其余四组,差异有统计学意义(P<0.05),生理盐水组EGF、VEGF、TGF-β含量低,其余三组EGF、VEGF、TGF-β含量介于三者之间且差异不大。结论 复方苦参黄柏溶液经氧驱动雾化对急性创伤修复模型大鼠的创面修复有促进作用、亦可提高组织中EGF、VEGF、TGF-β的含量,且三者对创面的修复可能具有相关性。

    【关键词】复方苦参黄柏溶液;氧驱动雾化;创伤修复;EGF;VEGF;TGF-β

    【中图分类号】R856.2

    【文献标识码】B

    【文章编号】ISSN.2095-6681.2018.12.192.03
    当前经济化的高速的发展,创伤的发病情况成为心脏病、脑血管病、肿瘤疾病之后,导致人类伤残甚至死亡第四个原因[1]。本实验从传统中药联合局部氧疗治疗创伤修复的思路出发,结合传统中药与氧疗的方法,创新氧驱动中药雾化局部外治的新型治疗方法,实验研究复方苦参黄柏溶液氧驱动雾化外治对创伤修复模型大鼠的治疗作用,并对其作用机理进行初步探讨,以期为治疗创伤皮肤修复提供新方法,并为新治疗方法提供实验依据。现将实验方法及结果报道如下。
    1 材料与方法
    1.1 动物
    清洁级SD大鼠75只,雄性,体重大约在200~250 g,由第四军医大学实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(军)2012-0007),在实验动物中心适应性饲养1周。
    1.2 药物与试剂
    复方苦参黄柏溶液的组成有:苦参30 g、黄柏20 g、苍术15 g、艾叶10 g、重楼25 g、花椒12 g。由陕西中医药大学附属医院中药房提供,饮片经提纯加工成每10 mL相当于原药材3.5 g的溶液,由陕西中医药大学附属医院制剂中心提制备。康复新液由四川好医生攀西药业有限责任公司提供。TGF-β、VEGF、EGF试剂盒由上海恒远生物科技有限公司提供
    1.3 主要仪器
    离心机,KDC-40(科大创新股份有限公司中佳分公司);酶标仪,RT-6000(深圳雷杜生命科学股份有限公司);自动组织包埋机,STD-30(德国莱卡公司);组织切片机,KHF-524(德国莱卡公司)等。
    1.4 方法
    1.4.1 造模
    造模前大鼠背部脱毛、称重,腹腔注射10%戊巴bi妥钠3.5 ml/kg麻醉后,消毒铺巾,在脊旁0.5 cm两侧,各作一个1.6*1.6 cm2矩形标记,切除全层皮肤,止血后用无菌纱布包扎,常规饲养。
    1.4.2 分组及换药
    造模完成后,利用随机法分组。造模成功后第2天,按文献方法折算大鼠用药量 [2]。模型组:15只,每天用生理盐水湿敷创面20 min。中药组:15只,每天用复方苦参黄柏溶液湿敷创面20 min。氧疗组:15只,每天局部氧疗20分钟。
    4.康复新液组:15只,每天用康复新液湿敷创面20 min。中药氧疗组:15只,每天用氧驱复方苦参黄柏溶液雾化创面20 min。雾化步骤:10 ml复方苦参黄柏溶液加入储药罐内,通过连接雾化嘴、雾化器储药罐、吸入管与氧气导管作为雾化管道,调节氧气装置直至储药罐有雾化液气出现,用雾化液气对创面进行治疗。换药每天1次,共14天,各组治疗完成后用无菌敷料包扎创面。
    1.4.3 取材
    对创面干预后第3、7、14天。每组5只大鼠,消毒,铺巾,切除全层皮肤不伤及皮下脂肪及深筋膜,采取标本后颈椎脱臼处死实验动物。标本一部分称取重量,加入一定量的磷酸缓冲盐溶液(PBS),备用。使用时,用匀浆器将标本和PBS的混合物研磨充分。用离心机在转速为2000~3000转/分下保持20 min后移液枪收集上清液等待检测各项指标。标本融化后仍然保持2~8℃的温度,使用EGF、VEGF和TGF-β试剂盒进行细胞因子水平检测;另一部分放在10%福尔马林溶液中固定24 h,然后脱钙48 h备用,后期做石蜡切片。

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