恒远产品文献:组胺,IL -5,IL-12试剂盒文献应用

嗜酸乳酸杆菌对过敏性鼻炎模型大鼠血清中组胺、IL-5、IL-12及组织中ＩＣＡＭ－１的影响

池海超，陈 觅，张 杰

［摘要］ 目的 探讨嗜酸乳酸杆菌（ＬＢＡ）对过敏性鼻炎模型大鼠血清中组胺、白细胞介 素（ＩＬ）－５、ＩＬ－１２及组织中细胞黏附因子－１（ＩＣＡＭ－１）的影响。方法 ４８只雄性ＳＤ 大鼠随机分为对照组、模 型 组、ＬＢＡ 组（１×１０１０ＣＵＦ／ｋｇ）、氯 雷 他 定（ＬＲＤ）组（５ｍｇ／ｋｇ），每组１２只；ＬＢＡ 组每天灌胃１次，共６周；ＬＲＤ组每天灌胃１次，共７ｄ。对大鼠临床症状进行评分，并检测血清中组胺、ＩＬ－５、ＩＬ－１２的水平，鼻黏膜组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ 及蛋白的表达，观察组织病理改变。结 果 ＬＢＡ 能 显 著 改 善 ＡＲ 模 型 大 鼠 症 状评分，组织病理评分，改善 ＡＲ引起的鼻痒、喷嚏、清涕等 症 状；降 低 血 清 组 胺、ＩＬ－５水 平，组 织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ 及 蛋 白 表 达，提 高血清ＩＬ－１２水平，对 ＡＲ有显著治疗作用。结 论 长 期（６周）给 予 ＬＢＡ 治疗可降低血清组 胺、ＩＬ－５水 平 及 组 织 中ＩＣＭＡ－１的 表达，提高血清ＩＬ－１２水平对 ＡＲ发挥治疗作用。

［关键词］ 过敏性鼻炎；白细胞介素－５；白细胞介素－１２；细胞黏附因子－１

［中图分类号］ Ｒ２８５．５

［文献标识码］ Ａ

［文章编号］ １６７１－８３４８（２０１５）３１－４３７９－０３

过敏性鼻 炎（ａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，ＡＲ）是呼吸系统常见的、多发的一种疾病，不仅严重地危害了人们身体健康而且容易诱发多种疾病［１］。ＡＲ主要是患者吸入变应原，炎症介质的释放，导致鼻黏膜发生炎 症［２］。同时发病原因也和体质、遗 传、免 疫等因素息息相关３］。ＡＲ 的临床表现主要有鼻塞、流 鼻 涕、鼻痒、打喷嚏及嗅觉功能障碍等。此 外，它还可能导致或并发鼻窦炎、鼻息肉、咽炎、中耳炎、气管和支气管炎、哮喘和变应性眼结膜炎等 疾 病，严 重 影 响 人 们 的 睡 眠、学 习、工 作 及 生 活 质量［４－５］。ＡＲ主要通过药物 进 行 治 疗，存在安全性方面的问题，同时伴发较多不良反应［６］。有研究证明嗜酸乳酸杆菌（ｌａｃｔｏ－ｂａ－ｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ，ＬＢＡ）能够通过调剂免疫反应预防或减轻过敏性症状，对临床上 ＡＲ的防治有深远意义［７－８］。但免疫调节机制尚未十分清楚，本研究拟建立 ＡＲ大鼠模型，通过乳酸杆菌对模型大鼠组织中ＩＣＡＭ－１及血清中组胺、白细胞介素（ＩＬ）－５、ＩＬ－１２的影响，探讨乳酸杆菌对 ＡＲ大鼠免疫调节作用机制。

１ 材料与方法

１．１ 实验 动 物、主要仪器及试剂 ＳＰＦ 级 雄 性 ＳＤ 大 鼠 ４８只，扬州大学实验动物中心提供，体质量２００～２２０ｇ。ＬＢＡ 浓缩冻干粉，有效活菌数 大 于 或 等 于１００亿 个／ｇ，购 自 广 东 金 辛医药科技有限公司。卵 清 蛋 白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ）购 自 上 海 化学试剂厂。氯 雷 他 定 片（ｂｏｒａｔａｄｉｎｅｔａｂｌｅｔｓ，ＬＲＤ）１０ｍｇ／片，购自上海先灵葆雅制药有限公司。氢 氧 化 铝［Ａｌ（ＯＨ）３］购 自上海凌峰化学试剂有限公司；组胺、白细胞介素－５（ＩＬ－５）、ＩＬ－１２试剂盒购自上海恒远生物科技有限公司；Ｔｒｉｚｏｌ试 剂、逆 转 录试剂盒、Ｔａｑ酶、上下游引物由上海生工生物科技有限公司生产或合成。ＢＣＡ 蛋白浓度测定盒购自杭州碧云天生物技术研究所；ＩＣＡＭ－１一抗、山羊抗大鼠二抗、ＥＣＬ发光显色液购自美国 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司。其他试剂均为分析纯。

１．２ 分组及造模 将４８只雄性ＳＤ大鼠分为４组：对照组、模型组、ＬＢＡ 组、氯雷他定（ＬＲＤ）组，每组１２只。ＬＢＡ 组每天按照２ｍＬ／ｋｇ灌服配制好的 ＬＢＡ 混悬液；对 照 组、模 型 组、ＬＲＤ组每天灌服等量生理盐水，连 续 灌 服３周。第４周，按 照 参 考文献方 法［８］，具 体 方 法 为：模 型 组、ＬＢＡ 组、ＬＲＤ 组 大 鼠 以ＯＶＡ１０ｍｇ、Ａｌ（ＯＨ）３３０ｍｇ及生理盐水１ｍＬ混合后腹腔注重庆医学２０１５年１１月第４４卷第３１期 ９７３４射，隔天１次，连续７次，进 行 初 次 免 疫；第１５天 进 行 激 发，每天给予５％ ＯＶＡ２０μｇ滴鼻／侧和１％ＯＶＡ 喷雾 吸 入５ｍｉｎ，连续７ｄ。对照组同期使用无菌生理盐水进行假致敏及假激发。

１．３ 给药方法 ＬＢＡ 组按照２ｍＬ／ｋｇ大鼠体质量 灌 服 配 制好的 ＬＢＡ 混悬液，造模期间同时给药直到实验结束；ＬＲＤ 组于造模激发每天滴鼻前按照５ｍｇ／ｋｇ大鼠体质量灌服生理盐水溶解的 ＬＲＤ，每天１次，连 续 给 药７ｄ。对照组与模型组灌服等体积生理盐水。