杏仁核电点燃致痫大鼠血清与下丘脑 Ghrelin 表达的变化
李 杨1，2， 王 峰1，3， 刘 诤1，3， 杨光明1， 张 震1， 杨 武1， 孙 涛1，3
( 1． 宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室，银川 750004; 2． 宁夏医科大学第二附属医院神经外科，银川 750001; 3． 宁夏医科大学总医院神经外科，银川 750004) 摘要: 目的 观察杏仁核电点燃大鼠血清与下丘脑中神经肽 Ghrelin 表达的变化趋势，并探讨其原因及意义。
方法 健康雄性 SD 大鼠 64 只，随机分为空白组( n = 8) 、假手术组( n = 8) 和点燃组( n = 8) ，点燃组以后一次刺激为零点，再分为 3、6、12、24、48 和 72h 六个亚组，每个亚组 8 只。空白组不予处理; 假手术组只植入电极不予刺激; 点燃组植入电极后给予电刺激，制作杏仁核点燃致痫膜型。采用 ELISA 法检测血清中辛酰基化 Ghrelin 的浓度，并应用免疫组化和实时荧光定量 PCＲ 技术分析下丘脑中辛酰基化 Ghrelin 与 Ghrelin mＲ-NA 的表达情况。结果 假手术组与空白组比较，表达水平差异无统计学意义( P ＞ 0． 05) ; 与假手术组比较，点燃组大鼠血清中辛酰基化 Ghrelin 与下丘脑中辛酰基化 Ghrelin 与 Ghrelin mＲNA 的表达水平均显著降低( P ＜ 0． 05) ，并且二者在各时间点的变化趋势基本一致，即在癫痫发作后 3h 外周血中辛酰基化Ghrelin 的浓度与下丘脑中辛酰基化 Ghrelin 及 GhrelinmＲNA 表达均降低，6h 继续降低，在 12h 反弹出现一个峰值，而后在24、48、72h 逐步降低。结论 癫痫发作后，血清与下丘脑中神经肽 Ghrelin 水平均降低且变化趋势是一致的，通过检测血清中辛酰基化Ghrelin 水平，可以反映下丘脑中相应神经肽的变化趋势，可能成为临床癫痫诊断和疗效评估的一种新型检测指标。
关键词: 杏仁核; 点燃; 癫痫; 神经肽
中图分类号: Ｒ338． 2 文献标识码: A Ghrelin 是一种由 28 个氨基酸组成的具有多种生理功能的胃动素相关的神经肽。目前研究证实，它与癫痫发作有关。本研究通过杏仁核电点燃法建立大鼠癫痫模型，应用 ELISA、免疫组化以及实时荧光定量 PCＲ 技术，检测大鼠血清辛酰基化 Ghrelin 和下丘脑中 Ghrelin 的表达水平，并观察二者在大鼠癫痫发作后各个时间点的表达情况，初步探讨其变化的原因及意义。
1 材料与方法
1． 1 ELISA 试剂盒及辛酰化 Ghrelin 抗体( 上海恒远生物有限公司) ; 兔超敏二步法免疫组织化学检测试剂盒 PV － 9001 与 DAB 显色试剂盒ZLI9017( 北京中杉金桥生物技术有限公司) ; 实时荧光定量 PCＲ 反应试剂盒#K1621 逆转录系统与即用型 2X 预混母液( 美国 Thermo 公司) ; 引物合成( 上海生工生物工程技术服务有限公司) 。1． 2 实验动物及分组 清洁级 6 ～ 8 周龄雄性Sprague － Dawley 大鼠由宁夏医科大学实验动物中心提供，体重 250 ～ 280g，单笼饲养。温度保持在 20 ～ 23℃，湿度 8% ～ 10% ，自由饮食，昼夜节律。按照随机数字表法分为空白组( n = 8) 、假手术组( n = 8) 、点燃组( n = 48) ，点燃组以后一次刺激结束开始计算，分为 3、6、12、24、48 和 72h 六
个亚组( n = 8) ［1］。空白组不作处理，假手术组只植入电极不予刺激; 点燃组植入电极并给予电刺激，制作杏仁核点燃癫痫模型。 ......想要阅读文献全文，可点击下载或者前来联系我司业务员领取文献哦！ |
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