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恒远产品文献:白细胞介素10,白细胞介素17在文献中的引用

  • 发布日期:2019/12/13      浏览次数:689
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    绞股蓝总皂苷对非酒精性脂肪肝大鼠 Treg/Th17 免疫功能的影响
    阮丹,雷婧(杭州市第三人民医院,杭州 310000) 

    摘要:目的 研究绞股蓝总皂苷对非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝脏保护作用及免疫调节作用机制。方法 48 只 SD 大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,多烯磷脂酰胆碱胶囊组(阳性对照组,150 mg·kg1)及绞股蓝总皂苷高、中、低(240,120,60 mg·kg-1)剂量组,除正常对照组外,其余各组连续饲喂高脂饲料 10 周,制备NAFLD 模型;模型成功后,各组连续给药 8 周。实验期间,分别于给药 0,4,8 周眼眶取血检测血清 AST、ALT;末次给药后,采用流式细胞技术检测外周血 Th17 和 Treg 细胞含量;酶联免疫法检测血清 IL-17、IL-10 及 TNF-α 含量。HE染色检查肝组织病理变化和免疫组化法检查肝组织 IL-17 和 Foxp3 表达。结果 给药 4 周,绞股蓝总皂苷高剂量显著降低大鼠血清 ALT、AST(P<0.01);给药 8 周,绞股蓝总皂苷各剂量均能显著降低血清 ALT、AST(P<0.05,0.01)。绞股蓝总皂苷高、中剂量能改善肝组织病变,降低 TNF-α 水平;高剂量显著降低 IL-17、升高 IL-10 水平(P<0.05,0.01),降低淋巴细胞 IL-17 含量,升高 CD4+CD25+Treg 含量(P<0.05),明显减少炎症因子 IL-17 的表达和增加 Foxp3 表达。

    结论 绞股蓝总皂苷能改善 NAFLD 大鼠肝脏病变,其作用机制可能与调节肝脏 Treg/Th17 细胞平衡,减少促炎症因子和增加抗炎因子产生相关。
    关键词:绞股蓝总皂苷;非酒精性脂肪肝;Treg/Th17 细胞;炎症因子
    中图分类号:R965.2 文献标志码:B 文章编号:1007-7693(2017)12-1683-06 

    非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素所致的,以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征,是脂肪肝主要类型。NAFLD 在我国患病率高达 15%[1];范围的患病率高达 12.9~46%[2]。NAFLD 的发生发展是一个多因素作用的复杂过程,除涉及脂质过氧化、线粒体功能障碍、炎性反应因子失平衡、天然免疫等外,NAFLD 发病过程还存在免疫功能失衡,表现为调节性 T 细胞(Treg)和辅助性 T 细胞 17(Th17)数目和功能的异常[3-4]。
    绞股蓝总皂苷是绞股蓝 (Gynostemma pentaphyllum)主要有效成分群,含有 80 余种达玛烷型四环三萜类人参皂苷类成分。绞股蓝总皂苷具有降脂保肝、降血糖、降血压、增强免疫力等药理作用[5-6]。研究发现,绞股蓝总皂苷能够调节机体 T 淋巴细胞亚群失调[7];抑制 NAFLD 肝病大鼠肝脏脂肪变[8]。然而绞股蓝总皂苷是否可通过免疫调节防治 NAFLD 及具体机制并不清楚。本实验采用高脂饲料诱导 NAFLD 大鼠模型,探讨绞股蓝总皂苷通过影响 Treg/Th17 细胞免疫功能,并从调节促/抗炎因子平衡途径研究其防治 NAFLD 的作用机制。
    1 动物与试剂
    1.1 动物及其饲料
    48 只清洁级 SD 大鼠,♂,体质量 180~220 g,许可证号 SCXK(浙)20080033,由浙江省医学科学
    院动物中心提供。高脂饲料含普通饲料 75%、猪油 12%、胆固醇 2%、胆盐 1%、蛋黄粉 10%,购
    于南通特洛菲饲料科技有限公司,批号为TP28708U。
    1.2 药物
    绞股蓝总皂苷(南京泽朗医药科技有限公司,批号:ZL20160321RJ,含量:80%)。多烯磷脂酰胆碱胶囊(赛诺菲,批号:4JD036,规格:每粒228 mg)。
    1.3 试剂
    CD4-FITC(货号:11-0040-81)、CD25-PE(货号:12-0390-80)及 IL-17-PE(货号:12-7177-81)流式试剂均购于 eBioscience 公司。白细胞介素 10(IL-10,批号:20161030)、白细胞介素 17(IL-17,批号:20161015) 及肿瘤坏死因子 -α(TNF-α ,批号:20160928)酶联免疫试剂盒购于上海恒远生物科技有限公司。IL-17(抗兔,货号:ab91649)和 Foxp3(抗小鼠,货号:ab22510)购于 abcam 科技有限公司。丙氨酸氨基转移酶(ALT,批号:16092401)、天冬氨酸氨基转移酶(AST,批号:16092401)试剂盒均购于宁波美康生物科技股份有限公司。苏木素-伊红染液(H&E,南京建成科技有限公司,批号:20160806)。

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