ELISA试验做复孔问题介绍

徐州医学院附属医院崔老师由同事介绍我公司，老师想做小鼠IL-6等相关指标的ELISA试验，老师介绍到样本量收集的较少（18个样本，总共分了6组。不同组的样本是不同药物处理的），而试剂盒的zui小规格就是48T（48T可以检测37个样本，11孔做标准空白对照孔），我司销售专员建议老师实验可以做个复孔，这样的实验报告结果会更加。

崔老师听取了我司销售专员的建议，在设计ELISA复孔检查时，提出问题：是对同一个样品作两次稀释，再分别加到板上的两个孔，还是只稀释一次，然后吸取两次分别加到两个孔？前者似乎把稀释时的误差也考虑到了，但做出来的结果两个孔相关挺大的。

我司技术答复：

采用后者。如果在实验室阶段，可能需要多次稀释，然后将不同稀释次数的分别做复孔，以便检查稀释过程中带来的误差；如果同一次稀释的复孔一致的存在检测差异大，可能ELISA板的均一性存在一定问题（排除操作因素）。如果不同稀释次数差异大，说明稀释方法有问题。

在ELISA实验中设复孔，目的是为了减少本次实验的系统误差对实验数据带来的影响，所以应该用第二种，有条件的话复孔的数量可以增加，系统误差更小。