李工年末分享细胞因子溶解方法

                                李工年末分享细胞因子溶解方法
     我们知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20oC或-80oC条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。

技术部李工分享： PeproTech细胞因子中不含载体蛋白（Carrier Protein）或其他添加剂（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以zui少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底（此时能否见到白色沉淀均属正常现象）。 

1．离心：高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。 

2．溶解（Reconstitution）：PeproTech细胞因子用去离子水或其它缓冲液（根据说明书要求进行选择）溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的产品，需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡，避免因化学键的断裂造成蛋白失活，可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间，待细胞因子*溶解后使用。溶剂的选择： 
      1）要求用去离子水溶解的产品，务必不可用盐溶液，避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出； 
      2) 要求用盐溶液溶解的产品，请依照PeproTech细胞因子说明书上的浓度，同样也是为了避免过高的盐浓度。 

 经常有用户会问，为什么会有这么多种溶解方法？
            答：我们知道，蛋白的溶解性与很多因素有关，其中比较重要的是pH值和离子强度。PeproTech的细胞因子或重组蛋白在出厂前均经严格测试，说明上所标明的溶解液是能够将该细胞因子或重组蛋白*溶解的液体。如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符，很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能*溶解或者根本无法溶解，这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。