赭曲霉素（Ochratoxin）试剂盒使用说明书

　　　　　　赭曲霉素（Ochratoxin）试剂盒使用说明书

使用目的：
本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中赭曲霉素（Ochratoxin）残留的定量检测。
实验原理
本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在微孔板包被有赭曲霉素（Ochratoxin）偶联抗原，加入赭曲霉素（Ochratoxin）标准品或样品，游离赭曲霉素（Ochratoxin）与微孔条上预包被的赭曲霉素（Ochratoxin）偶联抗原互相竞争抗赭曲霉素（Ochratoxin）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中赭曲霉素（Ochratoxin）含量成反比，通过标准曲线计算样品中赭曲霉素（Ochratoxin）的含量。
试剂盒组成
1 预包被的赭曲霉素（Ochratoxin）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
2 赭曲霉素（Ochratoxin）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0μg/ml，0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml
3抗赭曲霉素（Ochratoxin）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。
4显色液A：1瓶（6ml）。
5显色液B：1瓶（6ml）。
6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
7样本稀释液：1瓶（10×,  6ml），用于样品稀释用。
8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
贮存
1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻
2 未用完的微孔板应该密封干燥保存
注意事项
1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
2 不要使用过期试剂盒。
3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。
4 标准品中含有黄曲霉素，使用时应特别注意，操作时应带手套。
5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。
7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。
8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果
9 混合试剂时应避免起泡。
样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）
1取10g粉碎的样品，加 20ml 70%甲醇溶液
2强力振荡3分钟
3用Whatman 滤纸过滤
4取25µl处理后的样品，加入25µl样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2）
酶免分析步骤
1 实验须知
2实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
注：一定保证回温充分，否则影响检测的度和准确度。
3使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
4请不要改变分析程序
5请使用的微量移液器
6操作一旦开始，请不要中断任何程序
7ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作
8为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
9 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
10分析步骤
11预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测
12取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
13样品稀释液（10×）、浓缩洗涤液（10×）稀释成工作液（蒸馏水或去离子水稀释）
14在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml标准品溶液
15在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
16在各样品孔中加入50µl样品溶液
17在所有孔中加入50µl的抗黄曲霉素B1抗体酶结合物
18轻轻晃动反应板几秒钟。
1937℃温浴30min （温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）
20甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，zui后一次应在吸水纸上拍打以*除去孔中液体。
21反应
22洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl显色液A，再加 50µl显色液B；轻微晃动反应板使之*混匀
23 37℃温浴10min
24 每孔中加入50µl终止液，混匀
25 在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。

上海恒远生物科技有限公司是一家生物技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主要销售ELISA试剂盒，标准品对照品，血清，抗体，生物试剂、培养基等科研试剂，保证质量，价格合理，欢迎您（  ）。

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