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Elisa操作问题及方法解决方案(欢迎下载)

  • 发布日期:2015/5/19      浏览次数:1188
  • 提 供 商: 上海恒远生物科技有限公司 资料大小: JPG
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    操作过程中可能出现的问题和解决方法

    问题

    可能原因

    解决方法

    显色淡,灵敏度偏低

    1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高

    尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温


    2、试剂盒未充分平衡

    试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。


    3、培养箱温度不足37℃

    注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意


    4、保温时间不足

    校正定时钟准确定时


    5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加

    按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数


    6、移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁

    校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,一次性使用


    7、蒸馏水水质有问题

    使用新鲜合格的蒸馏水


    8、底物作用时间不足

    准确定时

    背景深,全部呈有色

    1、洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留

    浓缩洗液准确配制;10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释;充分洗涤,*拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染


    2、样品污染

    样品应新鲜采集,或低温保存,防止污染


    3、培养箱温度超过37℃或反应时间过长

    调整培养箱温度,准确定时


    4、吸嘴重复使用,未洗净或消毒不*

    吸嘴尽可能一次性使用


    5、蒸馏水被污染

    使用新鲜蒸馏水


    6、酶等试剂混用

    不同批号试剂勿混用


    7、一次实验的标本量过多,加样时间太长,导致实际反应时间延长

    合理安排实验,避免几块酶标板同时加样

    重复性不佳

    1、样品数量多少不一,加样时间有长有短

    重复某一样品时,加样时间尽可能与*次接近


    2、保温时间不一致,洗涤条件不一致,操作人员不一致

    重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性


    3、加样量不一致

    样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴

    出现白板,阳性对照不显色

    显色液变质

    更换新的显色液


    洗涤液配制有误

    请按说明书所示稀释倍数配制


    未加酶结合物而认为已加入

    注意不要漏加


    终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用

    每次加液前均应看清标签