本试剂盒仅供研究使用。 伏马毒素ELISA试剂盒使用目的: 本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血 清和尿样中伏马毒素(FB1)残留的定量检测。 伏马毒素ELISA试剂盒实验原理 本试剂盒采用竞争ELISA 方法,在微孔板包被有伏马毒素(FB1)偶联抗原,加入伏 马毒素(FB1)标准品或样品,游离伏马毒素(FB1)与微孔条上预包被的伏马毒素(FB1) 偶联抗原互相竞争抗伏马毒素(FB1)抗体酶标记物,用TMB 底物显色,加入终止液后颜 色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm 波长下进行检测,吸光值与样品中伏马毒素(FB1) 含量成反比,通过标准曲线计算样品中伏马毒素(FB1)的含量。 伏马毒素ELISA试剂盒组成 预包被的伏马毒素(FB1)偶联抗原的可拆酶标板:1 块(12 孔×8 条)。 伏马毒素(FB1)标准品:6 瓶(1ml/瓶),含量分别是: 0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb。 抗伏马毒素(FB1)抗体酶结合物:1 瓶(6ml)。 显色液A:1 瓶(6ml)。 显色液B:1 瓶(6ml)。 终止液:1 瓶(6ml),2M 硫酸。 样本稀释液:1 瓶(10×, 6ml),用于样品稀释用。 浓缩洗涤液:1 瓶(20×,20ml),用于洗板。 说明书一份。 伏马毒素ELISA试剂盒贮存: 1.试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻 2.未用完的微孔板应该密封干燥保存 伏马毒素ELISA试剂盒注意事项 1.使用试剂盒前请仔细阅读说明书。 2.不要使用过期试剂盒。 3.试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。 4.标准品中含有伏马毒素(FB1),使用时应特别注意,操作时应带手套。 5.终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。 6.不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。 7.不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响 实验结果。 8.稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果 9.混合试剂时应避免起泡。 伏马毒素ELISA试剂盒工作液准备 伏马毒素(FB1)标准品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb 浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用 样本稀释液:备用 显色剂:已备用,避免光线直照 反应终止液:已备用 伏马毒素ELISA试剂盒样品处理: 取10g粉碎的样品,加 20ml 70%甲醇溶液 强力振荡3分钟 用Whatman 滤纸过滤 取25μl处理后的样品,加入25μl样本稀释液于反应孔中(样本稀释倍数为2) 伏马毒素ELISA试剂盒结果计算 定量分析: 所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以*个标准(0标准) 的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。 B— 标准溶液或样本溶液的平均吸光度值 B0— 0μg/L标准溶液的平均吸光度值 以伏马毒素(FB1)浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根 据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为伏马毒素(FB1)浓度的对数 值,求得反对数即为测定液中伏马毒素(FB1)浓度C(ppb) 由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释 倍数。 半定量测定: 目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光 度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。 仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色 深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。 |