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请放心购买“人一氧化氮合成酶ELISA试剂盒”

  • 发布日期:2015-10-28      浏览次数:963
    • 十年沉淀,参考信息日益完善,操作流程方便易学,在科研界奠定了坚实的实验基础。科研人员不断潜心研发,让参考数值越来越,减少实验误差。现货供应,。满足行业的不同需求,针对不同客户的实验要求制定不同的使用方案。随着国内生物科研领域的发展,在未来的几年ELISA试剂盒的需求会更多。

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      检测范围:  96T

      1μmol/L - 32μmol/L

      使用目的:

      本试剂用于测定人血清、血浆及相关液体样本中一氧化氮合成酶 (NOS)含量。实验原理

      本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人一氧化氮合成酶 (NOS)水平。用纯化的人一氧化氮合成酶(NOS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS),再与 HRP标记的一氧化氮合成酶 (NOS)抗体结合,形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人一氧化氮合成酶(NOS)浓度。

      试剂盒组成

      1

      30倍浓缩洗涤液

      20ml×1瓶

      7

      终止液

      6ml×1瓶

      2

      酶标试剂

      6ml×1瓶

      8

      标准品( 64μmol/L)

      0.5ml×1瓶

      3

      酶标包被板

      12孔 × 8条

      9

      标准品稀释液

      1.5ml×1瓶

      4

      样品稀释液

      6ml×1瓶

      10

      说明书

      1份

      5

      显色剂 A液

      6ml×1瓶

      11

      封板膜

      2张

      6

      显色剂 B液

      6ml×1/瓶

      12

      密封袋

      1个


      标本要求

      1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于 -20℃保存,但应避免反复冻融

      2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。操作步骤

      1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

      2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

      待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

      3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 3 0分钟。

      4.配液:将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用

      5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此重复 5次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

      7.温育:操作同 3。

      8.洗涤:操作同 5。

      9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀, 37℃避光显色15分钟.

      10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

      11.测定:以空白空调零, 450nm波长依序测量各孔的吸光度( OD值)。测定应在加终止

      32μmol/L

      5号标准品

      150μl的原倍标准品加入 150μl标准品稀释液

      16μmol/L

      4号标准品

      150μl的 5号标准品加入 150μl标准品稀释液

      8μmol/L

      3号标准品

      150μl的 4号标准品加入 150μl标准品稀释液

      4μmol/L

      2号标准品

      150μl的 3号标准品加入 150μl标准品稀释液

      2μmol/L

      1号标准品

      150μl的 2号标准品加入 150μl标准品稀释液

      液后 15分钟以内进行。操作程序总结:

      计算

      以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

      注意事项

      1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

      2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

      3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

      4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数( n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

      5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物请避光保存。

      7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准 .

      8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

      9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期

      1.试剂盒保存:;2-8℃。

      2.有效期: 6个月

      标本收集方法:
      1. 血清:
      室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      2. 血浆:
      应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      3. 尿液:
      用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
      4. 细胞培养上清:
      检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
      5. 培养细胞
          检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      6. 组织标本
          切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

      人一氧化氮合成酶(NOS)elisa试剂盒   48次 1200元,96次,2200元,本公司提供免费代测服务,详情请咨询