去甲肾上腺素ELISA试剂盒使用说明书

去甲肾上腺素ELISA试剂盒使用说明书

(上海恒远生物科技有限公司)

1、应用范围

此试剂盒可用于人血清和尿液中去甲肾上腺素的体外定量检测。

2、临床意义

儿茶酚胺类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织，并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中，儿茶酚胺激素及其代谢产物变肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加，因而这些激素可用于疾病的诊断。所以，这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断，当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤，用户可使用各种动物材料进行实验。所有动物的儿茶酚胺的化学结构相同，因此此试剂盒可用于测大鼠、小鼠或其它动物。

3、实验原理

此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上，而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育，此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。

4、贮存与稳定性

试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定，前提是将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。

5、样品的采集与储存

注意	人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品：维生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制剂，还有降血压类药物。

血浆（EDTA）

注意	血液采集后两小时内，将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。
注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸的和脂血样品。如果样品出现混浊，则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。
贮存		2-8℃	≤-20℃	避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。
稳定性		6h	1个月

尿液

可以是自然尿液也可使用24h尿液。将病人24h内的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml 6N的HCl防腐剂的试剂瓶中。
贮存	≤-20℃	避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。
稳定性	6个月

6、试剂盒成分

注意：试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分

数量	标志	成分
1×12×8	MTP	包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，单克隆）。
1×6×2.5ml	CAL A-F	标准品A-F，即用 肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml (0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲肾上素:0;5;15;50;150;500ng/mL (0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL (0;78;228;750;2938;14688nmol/L) 内含[-]肾上腺素， [-]去甲肾上腺素， [-]多巴胺(有生物活性), 0.1M的HCl
1×2×2.5ml	CONTROL 1+2	质控品1+2 即用,含: [-]肾上腺素，[-]去甲肾上腺素， [-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl, 具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签.
1×250μL	ENZCONJ CONC	酶联物 浓缩型（100×） 内含：碱性磷酸酶标记的抗体，Tris缓冲液， HCl，0.01%的NaN3
2×	EXTRPLATE	提取板（微孔板） 每板24孔，包被了硼酸亲和凝胶。
1×60ml	EXTRBUF	提取缓冲液 粉红色，即用，内含：0.016%的NaN3
2×1.25ml	COMT LYO	COMT冻干粉 内含:儿茶酚-氧位-甲基转移酶（猪肝），NaN3
1×2ml	COMT ADD	COMT添加剂 内含:人血浆，稳定剂，0.01%硫柳汞。
1×7ml	ANTISERUM DO	去甲肾上腺素抗血清 紫罗兰色，即用， 内含:抗去甲肾上腺素抗体（兔），缓冲液，稳定剂。
2×1.25ml	COENZ	酶联复合物 即用，内含：S-腺苷-L-蛋白酸，稳定剂。
1×3ml	ENZBUF	酶缓冲液 即用，内含：Tris缓冲液，HCl，稳定剂。
1×17ml	RELEASEBUF	Release缓冲液 黄色，即用，内含：0.1M的HCl，指示剂。
1×3ml	ACYLREAG	酰化试剂 即用，内含：二甲基甲酰胺，乙醇。 注意：有毒，高可燃性。
1×50ml	WASHBUR CONC	洗涤液 浓缩型（10×） 内含：Tris缓冲液，HCl，吐温，0.2%的NaN3
1×9×	PNPP SUBS	PNPP底物片 内含：对硝基苯磷酸（PNPP）
1×27ml	PNPP BUF	PNPP底物缓冲液 即用，内含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN3
1×15ml	PNPP STOP	PNPP终止液 即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA
3×	FOIL	粘性金属板