样品或标准品“溢值”是什么原因造成的呢?

在ELISA试剂盒实验中科研新手总会遇到各种不同棘手的问题，比如空白值过高怎么办？样本要如何采集？血清能否反复冻融？等等，今天上海恒远要为您讲解的是在实验中样品或标准品“溢值”是什么原因造成的。

造成样品或标准品 “溢值” 主要有以下几点原因：
1）样品/标准品不正确稀释
要严格按照说明书来稀释样品和标准品。
2）偶合试剂不正确稀释
要严格按照说明书来稀释偶合试剂，浓度过高会造成OD的 “溢值” HRP偶合试剂的不正确稀释
3）所用稀释液不对
只能使用相应试剂盒内的稀释液稀释样品和标准品。
4）检测波长不正确
要保证分光光度剂的检测波长是正确的。
5）TMB底物的显色时间过长
请监控显色时间。说明书中所示的显色时间可能因为温度和其它检测条件的不同而稍有变化。
6）样品不适合此检测
在说明书中会列出每种产品的适用标本范围，超出范围的标本可能不适于此试剂盒或者检测条件需要摸索（如调节稀释度等）
7）样品/标准品污染
样品或标准品的污染可能会导致检测结果“溢值”。
8）孵育时间/温度不正确
要严格按照说明书来确定孵育时间和温度。
9）在孵育时为盖上酶联板覆盖物
在孵育时需盖上酶联板覆盖物，以防止液体蒸发或孵育期间的污染。每个试剂盒内均有足够数量的酶联板覆盖物

如果您的实验也同样遇到样品或标准品“溢值”，那么就需要仔细检查是否是您试剂的问题或者是操作方法不当的问题。只有质量良好的试剂和正确的操作才是的实验搭档。

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