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恒远生物|细胞培养需知

  • 发布日期:2023-11-07      浏览次数:312
    • 随着时代的发展,现如今的生命科学事业也在蓬勃发展,国内越来越多的实验室开始做起了细胞培养的相关实验,如果你打算或者是正在做细胞培养的实验那么以下的内容会对你的实验有所帮助。


      1、选择正确的培养基


            在养细胞之前,就要了解,你所养细胞的来源以及种类和名称,查阅一定量的文献,确定所需培养液种类以及是否需要添加特殊成分,常用的细胞培养液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常见的细胞基本可以使用这几种培养基中的一种来培养,有的需要加入一定其他成分,这需要根据不同的细胞类型,查ATCC细胞库或者查文献,才能找到所需要的培养液。(选择正确的培养液是养好细胞的第1步)


      2、了解细胞的生长习性


            不同的细胞生长习性不同,如成纤维细胞是贴壁生长,有一定的密度依赖性,密度小可能会出现不增殖,状态差的情况,接种密度大时则需要隔天传代,频繁传代则影响细胞状态;再如RPMI-8226人多发性骨髓瘤细胞,是悬浮生长的,传代需离心弃去上清即可。总之,了解细胞生长习性,再加上正确的计数,才能掌握好传代的密度。


      3、选择优质的血清


            血清中含有细胞生长所必须的生长因子,作为哺乳动物细胞培养的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,选择优质的血清,是细胞养殖成功与否的关键!


      4、及时传代和更换培养液


            在细胞增殖到一定的密度后要及时传代,根据细胞的生长速度和密度,及时更换培养液。更换过勤,浪费培养液,若不够及时,则细胞状态转差,一般需隔天更换培养液,具体可根据所养细胞种类予以调整。


      5、绝对的无菌意识


             如果无菌意识差,当细胞中混入了微生物,将会导致实验功亏一篑,细菌的生长速度和破坏力,将迅速占领培养皿,破坏细胞结构,有些初学者会在培养液中加入1%的双抗,但无菌意识不强,双抗亦无法拯救你的细胞!所以在培养细胞的过程中需要有这绝对的无菌意识才可保障细胞培养完好。


      6、倾心的呵护,频繁的观察


            做到以上几点,就可以开始养你的细胞了,但需要再次和大家强调的是细胞娇弱,在养细胞的过程中,难免会出现一些问题,要想成功培养好细胞,应时时注意并且不断地对细胞进行观察,初期一天可以观察个两次以上,出现任何预料外的情况应及时处理,才能保障后期收获一盘“漂亮"的细胞。


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