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人白介素23试剂盒操作步骤

  • 发布日期:2011-09-19      浏览次数:1418
    •       人白介素23试剂盒操作步骤

       

      本试剂盒仅供研究使用。
      检测范围:                                                          96T
      200 ng/L -5000 ng/L
       
      使用目的:
      操作步骤
      1.         标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

      5000ng/L
      5号标准品
      150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
      2500 ng/L
      4号标准品
      150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
      1250 ng/L
      3号标准品
      150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
      625 ng/L
      2号标准品
      150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
      312.5 ng/L
      1号标准品
      150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

       2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
      3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
      4.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
      5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
      6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
      7.         温育:操作同3。
      8.         洗涤:操作同5。
      9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
      10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
      11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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