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酶法试剂盒实验如何避免加样产生气泡呢?

  • 发布日期:2020-11-18      浏览次数:3450
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          通常气泡都是聚集在酶法试剂盒酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触,使孔内反应不均一。很多说明书、教科书上也都提到,加样时要避免出现气泡,这到底是什么原因呢?因为在做实验的过程中,有时为了打干净枪头里面的液体,很容易产生气泡,是不是这样对实验结果会后什么影响?

          1.通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触,使孔内反应不均一。

          2.包被时有气泡的话,将导致包被不*实际包被量下降-弱阳性甚至假阴性。

          3.封闭时有气泡的话,将导致大量未结合位点的存在,引起非特异性结合-本底增高,假阳性。

          4.加样时有气泡的话,抗原抗体不能有效的结合-弱阳性甚至假阴性。

          5.加二抗时有气泡的话,抗原抗体不能有效的结合-弱阳性甚至假阴性(竞争法相反-假阳性)。

          6.加显色液时有气泡的话-显色不*。

          7.加终止液时有气泡的话(1、不能*终止反应 2、影响酶标仪比色,OD值增高)

          8.洗涤时有气泡的话,非特异性结合物不能*洗去,做无用功。

          避免方法:
          1.加样时尽量靠近孔底(不要接触孔底),用力均匀,不要过快过猛。

          2.封闭时一定要加满孔。

          3.洗涤时一定要加满孔(重要),气泡会浮上来*终驱除。手工洗板时一定要吸干水分并用力拍干。
        
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