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干货:细胞培养出现沉淀,什么原因?

  • 发布日期:2019-06-19      浏览次数:3224
    •     细胞培养是实验中的重中之重,细胞没有培养好实验记性不了,细胞培养好了,为后面的实验打下了雄厚的基础!那细胞在培养中出现了沉淀,什么原因造成的呢?您知道吗?好了,不卖关子了,恒远邀您一起来看看!

          细胞培养中的沉淀

          如果排除了污染,细胞培养基中的浑浊通常被解释为金属、蛋白和其他培养基组分的沉淀。沉淀物可能损害细胞健康,因为他们通过螯合可移除养分和其他需要的组分,从而改变培养基的组成。沉淀物也是显微镜可见的,可能会干扰依赖成像的实验分析。

          产生沉淀的可能原因

          一、温度变化

          在细胞培养中,温度是引起沉淀的主要因素之一。当遭遇温度的变化时,高分子量血浆蛋白会从溶液中析出;热失活和冻融循环能促进蛋白降解和沉淀;因为液体或重组成培养基在使用之间保持冷藏储存,盐可能沉淀,尤其是10x或其他浓缩的储存液。

          二、失水诱导的浓度改变

          如果培养基可能蒸发,培养基组分(包括盐) 的浓度将会增加,特别是培养基表面可能容易形成晶体沉淀。

          三、钙盐

          制备无血清培养基时,组分添加的顺序可能导致不可溶分子的形成。钙盐尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反应产生CaSO4晶体。高压灭菌和pH值不稳定会加剧这一问题。

          四、金属补充物

          铜、铁和锌等金属离子是细胞生长所必需的,是无血清培养基的重要补充物。培养系统中其他血清组分的缺失可能导致这些金属沉淀,为细胞形成有毒的环境。在较高pH环境下(一般>8时),碳酸盐和氢氧根离子与铜离子、磷酸盐和氢氧根离子与铁离子、碳酸盐、磷酸盐和氢氧根离子与锌离子、氢氧根离子与镁离子易形成不溶性沉淀物;在氧化条件下,铜和锌更易于沉淀。

          五、污染

          培养物浑浊可能是细菌或真菌污染造成的。

          以上就是小编为大家整理的常见的几种细胞培养出现的原因哦,如您还有其他疑问也可前来咨询我司技术人员哦,我们拥有一批技术、经验丰富的技术工程师,专门为您的实验答疑解难!恒远专注科研试剂盒的研发及销售多年,涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域,满足您实验所需,以实现与客户的双赢,完善的库存及供应体系以及稳定的专业技术,保证产品均能现货供应。期待您的前来咨询选购。