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ELISA洗涤方法大揭秘

  • 发布日期:2019-04-17      浏览次数:4027
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          问题一:说明书上说洗板时要把孔里的水甩干,可我做的时候,无论我怎么拍,孔底还是有残留液体,请问这对试验有没有影响?或着有没有别的什么好的办法可以解决这个问题?

          答:有一定的影响.尤其二抗反应后洗涤不好,会出现非特异.ELISA试验中洗涤是关键.尽可能甩干,而且尽量少拍,不一定每次都很干,但是后一次洗涤要尽量干。洗涤中另一个值得注意的是尽量不要出气泡。如果有条件的话,可用洗板机。

          问题二:什么才叫封闭好了呢?有没有什么标准?

          答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果还有非特异反应的话,可能有其他原因,比如加样时溅到了壁上或有气泡,洗涤不充分,二抗浓度过高,封闭物不合适以及反应条件是否得当等。

          问题三:1%bsa,你是用什么稀释的,我用过pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀释,结果封闭的效果都不怎么明显,与不封闭差不多。

          答:1%BSA用PBS稀释就可以了。还有就是要注意你的操作,背景高不一定是封闭的问题。

          ELISA试剂盒洗板方法有以下两点

          一、手工洗板方法

          吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。

          二、自动洗板

          如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等。

          恒远是一家生产和销售科学研发用试剂产品公司,领域涵盖化学、分析化学、生命科学和材料科学等基础创新领域,助力客户的研究计划,在广大科研用户的帮助和支持下,经过不懈的努力,以过硬的产品质量和好的服务态度,为客户提供一个稳定平台,成为客户可信赖的长期合作伙伴。