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做ELISA实验,稀释倍数不会计算你就OUT了!

  • 发布日期:2017-03-23      浏览次数:14134
    •     稀释倍数就是稀释前溶液浓度除以稀释后的溶液浓度所得的商.要想知道如何配置稀释液,需要知道你原液的浓度。做ELISA实验,如果稀释倍数不会计算,那你就真的OUT了!

            
      稀释倍数=原液浓度/(原液浓度×移取体积/定容体积)
      例如,你有一瓶100mg/L的溶液,要稀释3倍、5倍、10倍、20倍.现有300毫升的容量瓶或其他可定容的容器.
      稀释3倍,即移取100mg/L的溶液100mL,定容至300mL;
      稀释5倍,即移取100mg/L的溶液60mL,定容至300mL;
      稀释10倍,即移取100mg/L的溶液30mL,定容至300mL;
      稀释20倍,即移取100mg/L的溶液15mL,定容至300mL.
      ELISA组成及试剂配制
      1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
      2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
      3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
      4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
      5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
      6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
      7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
      8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
      9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
      10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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