目前酶联免疫法检测用试剂盒种类繁多,有国外进口的,有国内自行研制生产的,如何在众多的品牌中选择既能满足检测要求又价格低廉的试剂盒是一个问题。本人根据使用这些试剂盒,在实际检测中发现,一般在试剂盒说明书中列出以下指标:zui低检测限;回收率;交叉反应率;标准曲线图谱及数据,标准曲线至少由5个浓度组成;IC50测定值及变形曲线点数目的是比较规范的试剂盒,可以选择。以下就针对酶联免疫试验进行验证的几个方法解析,欢迎阅读分享。
在使用酶联免疫法检测样品时,应对方法进行验证。主要测定以下内容:
1 标准曲线的测定,标准曲线至少由5个浓度组成,测定次数不少于5次,以确定工作浓度范围和IC50范围。一般临界值为IC50附近,检测灵敏度高。
2 样品检测限的测定。
3 样品添加回收实验。对禁用药物可添加定量限和2倍定量限,对于有zui高残留*(MRL)的药物,可添加MRL和MRL上下各一个浓度。
准确度:若回收率大于40%符合相应检测标准的要求。精密度:批内变异系数每批平行样之间的变异系数小于或等于25%,对于禁用药物小于或等于30%。批间变异系数所有样品间变异系数小于或等于30%,对于禁用药物小于或等于40%。
满足以上准确度和精密度要求,说明酶联免疫方法可行,可用来检测药物残留。
4 对于可用于多残留检测的试剂盒,以交叉反应率低的药物做阳性添加测定临界值(cut-off)。
5 实际检测样品时要包括以下实验:至少做两条标准曲线,两个阴性对照品,两个添加临界值(cut-off)的阳性对照品,两个平行的待检样品。检测结果出来后通过标准曲线形状(符合检测要求为S形),IC50与临界值是否相近及阳性样品回收率,样品平行情况可确定检测是否可信。
上海恒远生物从事ELISA试剂盒研发销售多年,拥有完善的服务体系,为您的实验保驾护航。我司近期新推出BIM品牌ELISA试剂盒,订购即送服务,您还等什么?赶紧拿起订购吧!