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植物维生素D3 ELISA试剂盒

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  植物维生素D3 ELISA试剂盒的详细资料:

产品名称:植物维生素D3 ELISA试剂盒

英文名称:Plant Vitamin D3,VD3 ELISA KIT

Elisa实验前的准备
  1仔细阅读说明书
  2确定试剂盒在有效期内
  3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
  4标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存
  5准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
  6根据检测标本数量确定所需试剂的量
  7按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂
  DIY夹心法ELISA常见技术指南
  8选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
  9ELISA实验中为了确定zui佳信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
  10标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
  11一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
  12为了优化灵敏度,建议隔夜孵育标准品和标本。
  13若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
  14当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig.

实验过程中加样可能碰到的问题:
1、过长(特别是室内温度较高时);
2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间;
3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。.血清或血浆标本分离不好即进行加样。
相应解决办法:
1、标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2、加样后及时放入孵箱。
3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4、如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5、标本较多时,请分批操作。 

   ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。

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