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人幽门螺杆菌抗体IgG(HP IgG)酶联免疫分析

人幽门螺杆菌抗体IgG(HP IgG)酶联免疫分析

简要描述:
人幽门螺杆菌抗体IgG(HP IgG)酶联免疫分析用于测定人血清、血浆及相关液体样本中幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)表达

更新时间:2019-03-19

访问量:347

厂商性质:生产厂家

生产地址:上海恒远

人幽门螺杆菌抗体IgG(HP IgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

 本试剂盒仅供研究使用。

  规格:96T

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)表达。

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物, 经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较, 从而判定标本中幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)的存在与否。

试剂盒组成

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×1 瓶

7

终止液

6ml×1 瓶

2

酶标试剂

6ml×1 瓶

8

阳性对照

0.5ml×1 瓶

3

酶标包被板

12 孔×8 条

9

阴性对照

0.5ml×1 瓶

4

样品稀释液

6ml×1 瓶

10

说明书

1 份

5

显色剂 A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 张

6

显色剂 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 个

标本要求

1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤

1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1

孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

 

 

  • 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
  • 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
  • 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3。

 

8. 洗涤:操作同 5。

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

 

 

人幽门螺杆菌抗体IgG(HP IgG)酶联免疫分析计算和结果判定:

试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10 临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

阴性判定:样品 OD 值< 临界值(CUT OFF)者为幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)阴性阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为幽门螺杆菌抗体 IgG(HP IgG)阳性

注意事项

1. 操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

2. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

3. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5. 底物请避光保存。

6. 试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm

7. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。

保存条件及有效期

1. 试剂盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 个月

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