一、人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒详细参数
规格:96T
品牌:RD
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:六个月
【Elisa货期】现货
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【Elisa说明书】索取
【ELISA试剂盒】提供免费检测服务:使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。我们将根据实验工作量和难易程度,双方协定实验周期,保质保量完成委托实验,并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。
二、人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒实验中zui可能出现问题
一、所有孔未显色?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不*,微孔中存在游离的抗体。
2、用错试剂。
3、在操作中忘记加酶或抗体。
解决办法:
1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前,要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。
二、所有孔显色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不*,微孔中存在游离的抗体。
2、洗板不干净。
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。
4、温度没达到要求。
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。
解决办法:
1、手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。
3、严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。
4、控制孵育温度在25℃。
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。
Elisa实验前的准备
1仔细阅读说明书
2确定试剂盒在有效期内
3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
4标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存
5准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
6根据检测标本数量确定所需试剂的量
7按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂
DIY夹心法ELISA常见技术指南
8选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
9ELISA实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
10标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
11一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
12为了优化灵敏度,建议过一夜孵育标准品和标本。
13若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
14当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig.
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